位于歌舞伎町一隅的万事屋，午夜坂田银时（小栗旬 饰）、午夜志村新八（菅田将晖 饰）和神乐（桥本环奈 饰）因为没钱交房租而焦头烂额，于是三人只得外出打工。他们先是去夜总会担任女招待，之后又临时充当理发师，可好死不死都碰上了微服出访的将军大人德川茂茂（胜地凉 饰），令他们战战兢兢，如履薄冰。另一方面，真选组土方十四郎（柳乐优弥 饰）遭伊东鸭太郎（三浦春马 饰）暗算，从刚硬坚毅的武士变成了柔弱怯懦的御宅族，最终被真选组扫地出门。在此之后，伊东联合鬼兵队，策划足以颠覆江户政府的大阴谋……本片根据空知英秋的超人气漫画改编改编，是同系列真人电影的第二部，此次的故事根据“将军接待篇”和“真选组动乱篇”改编。